Čistenie ambulancií si vyžaduje vyváženie všeobecnej hygieny vozidiel so špecifickými požiadavkami na zdravotnú bezpečnosť; zvyčajne sa delí na tri zložky: vonkajšie čistenie, vnútorné čistenie kabíny a dezinfekcia lekárskeho vybavenia. Čistenie exteriéru sa zameriava predovšetkým na odstránenie blata, prachu a nečistôt; toto sa vo všeobecnosti dosahuje opláchnutím vodou v spojení s neutrálnym čistiacim prostriedkom, pričom sa striktne vyhýbajú používaniu vysoko korozívnych chemikálií, aby sa predišlo poškodeniu laku vozidla a výstražných štítkov.
Vzhľadom na to, že vnútorná kabína slúži ako priestor pre liečebné procedúry, sú normy čistenia pre túto oblasť podstatne prísnejšie. Ihneď po dokončení každej prepravnej misie pacienta musia byť všetky úlomky alebo nečistoty v kabíne okamžite odstránené. Okrem toho, povrchy, ktoré sú na dotyk-, ako sú nosidlá, sedadlá, zábradlia a podlahy-, musia prejsť dôkladnou dezinfekciou. Zvyčajne sa to dosiahne utretím alebo postriekaním týchto povrchov dezinfekčnými prostriedkami, ktoré spĺňajú zavedené medicínske normy, čím sa zabezpečí účinná eliminácia baktérií a vírusov a zabráni sa krížovej{6}}kontaminácii.
Pokiaľ ide o palubné lekárske vybavenie,-ako sú pacientske monitory, defibrilátory a systémy na dodávku kyslíka-špecializované postupy čistenia a dezinfekcie sa musia dodržiavať v prísnom súlade s protokolmi správy zdravotníckych zariadení. Zvlášť treba dbať na to, aby sa do vnútra týchto zariadení nedostali tekutiny, ktoré by mohli ohroziť ich správnu funkčnosť. Okrem toho by sa vozidlo malo pravidelne hĺbkovo čistiť a dezinfikovať; konkrétne po preprave pacientov s infekčnými chorobami alebo po dokončení misií s vysokým rizikom kontaminácie sa musia vykonať prísne protokoly o konečnej dezinfekcii, aby sa zabezpečilo, že vozidlo bude konzistentne spĺňať všetky bezpečnostné požiadavky na lekárske použitie.
